【碩士】聚氨酯固定化糞鏈球菌制備L-瓜氨酸的研究

內容簡介

　　【碩士】聚氨酯固定化糞鏈球菌制備L-瓜氨酸的研究　　授予學位：碩士　　學位授予單位：北京化工大學　　學位年度：2011　　瓜氨酸作為-種非蛋白質氨基酸，在尿素循環(huán)中起著重要的作用。本文建立了使用聚氨酯固定化糞鏈球菌制備L-瓜氨酸的方法，并研究了反復批次發(fā)酵以及填充床中連續(xù)轉化生產L-瓜氨酸的生產工藝，最后使用光譜法研究了L-瓜氨酸與牛血清白蛋白的相互作用。建立了-套成本低，產量高，生產簡便，產品質量高的路線，為今后工業(yè)化生產L-瓜氨酸奠定了基礎?！　? 本文首先考察了使用聚氨醋固定化糞鏈球菌(Streptococcus faecalisBT001)的可行性。實驗表明，經(jīng)過多次洗滌后，固定化菌體量可達0.632g}g，效果良好，確定糞鏈球菌與聚氨酯載體有較好的生物相容性?！　? 進-步設計了一系列實驗對固定化的影響因子進行了考察，當聚氨酯添加量為1.0g，尺寸為5*5*5mm，培養(yǎng)基pH值為7.0，搖床溫度為35 C ,轉速為150rmizi，經(jīng)過52h達到最大吸附量。同時確定了在搖床中固定化細胞轉化制備L-瓜氨酸的最適條件:搖瓶裝液量為5OmL/250mL，加入0.6g固定化細胞，底物100g}L-的L-精氨酸，表面活性劑CTAB 0.3g.L-,起始pH為7.0，搖床轉速為100r.miri,溫度為35 0C的條件下轉化36h,L-瓜氨酸產量最大可達到53g.L。得到的固定化細胞可重復使用5個批次，大大縮短了轉化時間?！　? 本實驗還考察了固定化細胞在填充床反應器中制備L-瓜氨酸的工藝過程。在規(guī)格為，40X300反應柱中裝有固定化細胞26g，反應液含100g.L的L-精氨酸，0.3mo1.L，的醋酸緩沖液，0.3g.L的表面活性劑CTAB，調節(jié)pH值為7.0，設定流速為40mL.h，恒溫水槽35℃的條件下，固定化細胞在填充床反應器中可連續(xù)使用巧次，L-瓜氨酸的產量基本維持在65g.L左右?！　? 最后，本文采用熒光碎滅法以及紫外吸收差譜法研究了L-瓜氨酸與牛血清白蛋白在不同pH值下的相互作用機制，并利Stern-Volmer方程求解出各種參數(shù)。　　

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